验证结果：

      

 

                      白光对照                                                         DiI 加入15分钟

自备试剂及耗材：

吸头/吸水纸/离心管

 

保存说明：

-20 ºC,避光保存。

 

使用说明：

1. 工作液制备：取1ul DiO染色剂用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）1ml稀释，配制成工作液。

2. 贴壁细胞的染色（以24孔板为例）：

a. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

b. 从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。

c. 在盖玻片的一角加入100 μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

d. 37℃孵育细胞 2～20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。

e. 吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10 min，然后吸干培养基。

3.悬浮细胞染色

a. 加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

b. 37℃孵育细胞2～20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20 min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。

c. 孵育结束，按1000～1500 rpm离心5 min。

d. 倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

e. 重复c,d步骤两次以上。

 

注意事项：

1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2. 染色固定的细胞或组织时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛固定，使用其它不适当固定液会导致荧光背景较高。

3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海