产品包装：

产品编号	产品名称	包装	保存温度
DW2114-A	细胞固定液	100ml	-20度
DW2114-B	封闭液	6ml	-20度
DW2114-C	二抗染色液	200ul	-20度
DW2114-D	抗体稀释液（一抗 二抗）	10ml	-20度
DW2114-E	细胞核染色液	5ml	-20度
DW2114-F	抗荧光淬灭封片液	5ml	-20度
DW2114-G	PBS粉	1L	常温
DW2114-H	盖玻片	24*50	常温

 

自备试剂及耗材：

吸头/吸水纸/一抗/离心管

一抗要求：抗体来源分别为兔（Rabbit）源/小鼠（Mouse）源

 

实验步骤：

a. PBS配制： 取出G号试剂，加入1L双蒸水，溶解即可，后面实验清洗均匀这个试剂，后面步骤均用G代替。

b. 取出做好的爬片/准备好的细胞，用加入1ml G液洗2-3次。

c. 加1ml A液，室温置放30分钟，后去掉液体，用G液洗2-3次。

d. 滴1-2滴B液，室温孵育30分钟。注意：液体的量要覆盖细胞。

e. 用吸水纸吸掉B液，加入自己准备的一抗混合液，室温孵育1-2小时；一抗可用D液稀释。此步骤加的液体一定要全覆盖标本。

f. 用G液洗标本3次，每次浸泡3-5分钟。

g. 准备1个离心管，取2ul C液加入到100ul D液中混匀，该剂量为2-4张8mm爬片的量，请自己根据标本的数量和大小自动调整，用量即为液体覆盖到标本即可。

h. 用吸水纸吸掉第6步洗后的液体；注意：每次吸液体，吸水纸只能在细胞边缘。

i. 加20-50ul第7步配制的液体，室温孵育60分钟。用量自己可以调整，液体覆盖到标本即可。

j. 用G液洗3次，每次3-5分钟。

k. 用吸水纸吸干多余的液体，加入2-3滴E液，染色5分钟。

l. 用G液洗3次，每次3-5分钟。

m. 吸水纸吸干多余的液体，加2-3滴F液体。用盖玻片封片。

n. 及时拍照，如果不能拍照，建议放4度冰箱。

 

所用荧光激发和接收波长：

①DyLight 488是一种绿色荧光团，其最大吸收波长在493nm，相应的最大发射波长是518nm。

②DyLight 549是一种黄红色荧光团（显微镜下红色），其最大吸收波长在555nm，相应的最大发射波长是568nm。

③E为细胞核染料，是一种蓝色，其最大吸收波长在358nm，相应的最大发射波长是461nm。

 

染色结果：

绿色为兔（Rabbit）源抗体染色指标；红色为小鼠（Mouse）源抗体染色指标；蓝色为细胞核。

 

注意事项：

1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海