产品介绍：

油红O (Oil Red O, 简称ORO)是一种脂溶性偶氮染料，是很强的脂溶性试剂和脂肪染色剂，能特异性地使细胞或组织内甘油三脂等中性脂质等染色，而对磷脂和类固醇等染色较弱。当细胞或组织切片浸入油红O染色液时，油红O溶于细胞或组织内的脂肪(如脂滴)中，使其呈红色或橙红色。本品为饱和油红O染色液，操作简捷，性能稳定，着色清晰。

本产品适用于细胞、组织冰冻切片、骨髓涂片或血涂片等样品，但不适合用于石蜡切片样品。

 

储存条件:

室温，避光保存，有效期一年。

 

使用说明（仅供参考）：

1. 样品处理：

a. 对于细胞：

①缓慢吸去细胞培养液，PBS洗涤1次。

注：对于贴壁不太好的细胞，加入任何溶液时，不宜直接将溶液加到细胞上，而应沿着孔板壁缓慢加入，然后轻轻混匀，这样可以避免将在加入溶液时使细胞漂浮起来。

②加入4%多聚甲醛固定液或10%甲醛溶液固定10min，PBS漂洗2次。

b. 对于冰冻切片：

取出预制好并保存于-20ºC的冰冻切片，放入切片架回温5-10min。

c. 对于骨髓涂片和血涂片：

①取少许样品置于载玻片上，将推玻片与载玻片保持30°角，用推玻片来回将骨髓推匀于玻片表面，最好制稍厚一点的涂片。将涂片在空气中自然干燥或吹干。

②选做：用4%多聚甲醛固定液或10%甲醛溶液固定10min，固定后PBS漂洗2次。

2. 油红O染色工作液的配置

饱和油红O原液按3:2（油红O：蒸馏水）加入蒸馏水，混匀，室温放置5-10min，过滤后使用。

注：该工作液现配现用，2h内使用最佳，不可以过夜。

3. 油红O染色。

a. 对于细胞：

①加入适量75%乙醇（或60%异丙醇）覆盖细胞20秒。

②吸除75%乙醇（或60%异丙醇），加入适量油红O染色工作液，染色10-20min。

注1：染液体积均匀覆盖细胞即可，以6孔板为例，可加入1ml染色工作液。

注2：可适当延长染色时间，但不要超过1小时。

①去除油红O染色工作液，加入适量75%乙醇（或60%异丙醇），静置30秒，然后去除75%乙醇（或60%异丙醇），用蒸馏水洗涤20秒。

②选做：可用苏木素染色液进行细胞核的复染，染色3-5min，蒸馏水漂洗。

③加入适量PBS，均匀覆盖细胞即可，显微镜下观察和拍照。

b. 对于冰冻切片、骨髓涂片和血涂片：

①加入适量75%乙醇（或60%异丙醇）覆盖样品20秒。

②吸除75%乙醇（或60%异丙醇），用蒸馏水稍清洗。

③将配制好的油红O染色工作液滴加于切片上，或直接将切片浸入染色工作液中，密闭染色10-20min。

注：可适当延长染色时间，但不宜超过1小时。

④去除油红O染色工作液，将适量75%乙醇（或60%异丙醇）滴加于切片上，静置30秒，然后去除75%乙醇（或60%异丙醇），浸入蒸馏水中置于摇床洗涤20秒。

⑤选做：可用苏木素染色液进行细胞核的复染，染色3-5min，蒸馏水漂洗。

⑥染色完成后可以直接观察和配制。也可以使用水性封片液封片，推荐使用Dowobio的抗荧光淬灭封片液，然后镜下观察和拍照。

 

注意事项：

1. 第一次使用本试剂时建议先取1-2个样本做预实验。

2. 油红O溶液是饱和溶液，室温或4ºC保存时，可能会有少量沉淀析出或瓶壁有少量不溶物粘附，不影响使用。

3. 油红O染色时，应避免染色工作液挥发，否则染色工作液可能会形成沉淀而产生背景。

4. 油红O染色结果不能长期保存，染色完毕后应尽快观察拍照。

5. 样品固定时请使用4%多聚甲醛固定液，不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。

6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海