当前位置：首页>病理及染色试剂>免疫组化（IHC）快速孵育抗体稀释液 （免封闭）
说明书下载— 1小时替代过夜，一步孵育，无需封闭，兼容：该稀释液也适用于4度过夜孵育，一抗/二抗通用
1. 产品名称与概述
本稀释液为即用型工作液，专门用于免疫组织化学（IHC）、免疫细胞化学(ICC)等免疫实验中一抗与二抗的稀释。其配方含有稳定剂与保护成分，能维持稀释后抗体的活性，能加速一抗和抗原的结合，节约很多时间。
使用本产品稀释的抗体工作液可在4℃保存并重复使用不少于一周，有助于节约宝贵的抗体试剂。
产品组分与储存
主要成分：专有缓冲体系、蛋白稳定剂、防腐剂。
保存条件：4度
保质期：一年
免疫组化实验步骤（参考）：
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步 骤 |
操作 |
关键细节与建议 |
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脱蜡与水化 |
切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化至蒸馏水。 |
确保彻底脱蜡，否则易导致染色不均或背景过高。 |
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抗原修复 |
根据一抗要求，采用适当的缓冲液（如枸橼酸盐（货号DW2016）或 EDTA缓冲液（货号：DW2011））进行热诱导抗原修复。 |
修复后需自然冷却至室温，再进行后续步骤。 |
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阻断内源性酶 |
使用内源性过氧化物酶阻断液（货号：DW2177）溶液孵育10-30分钟，以消除内源性过氧化物酶活性。 |
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一抗孵育 |
用本稀释液按抗体说明书推荐起始浓度配制一抗工作液，滴加至切片。 |
孵育方案二选一： 随后用TBST充分洗涤3次 |
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二抗孵育 |
用本稀释液将HRP标记的二抗按 1:200至1:500 稀释，滴加至切片。 |
室温或37℃孵育 30分钟至1小时。随后用TBST充分洗涤3次。 |
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显色与复染 |
滴加DAB（货号：DW2032）等显色底物，在显微镜下控制显色时间。自来水终止后， |
DAB显色时间需灵活掌握，至目标信号清晰而背景较浅时即可终止。 |
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细胞核染色 |
用苏木素（货号：DW2024）进行细胞核复染，染色3-5分钟。 |
如果蛋白是细胞核表达，可以不染苏木素或者减少染色时间。 |
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封片 |
切片经脱水、透明后，使用无毒性中性树胶（货号：DW2183）封片，长期保存。 |
常规中性树胶含有二甲苯，建议用无毒性中性树胶 |
孵育时间选择：您可以根据蛋白的表达量，做适当的调节：
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方案 |
一抗孵育 |
二抗孵育 |
适用场景 |
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方案一 |
37℃， 1-2小时 |
室温/37℃， 30分钟-1小时 |
高丰度蛋白，非特异性结合比较强，需当天出结果。 |
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方案二 |
4℃， 过夜 |
室温/37℃， 30分钟-1小时 |
检测低丰度靶标，追求高信噪比。 |
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100ml |
注意事项：
1、使用范围：本产品仅限于专业人员的科学研究用途，不得用于临床诊断、治疗或任何食品、药品领域。
2、抗体回收：为延长回收后抗体的使用寿命，建议在4℃条件下进行一抗孵育。
3、核心操作要点说明
4、抗体稀释：始终以抗体生产商说明书推荐的起始浓度作为一抗稀释依据。二抗的通用起始稀释范围在1:200至1:500。
本产品在文章中的写法：
英文： Dowobio （Shanghai，China）
中文： 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio，上海
