产品介绍：

Delivector是一款优秀、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，可在大的生产容器内（从96孔板到100L生物反应器）提供连续性的高基因表达。

本品是Delivector的无菌溶液，浓度为1mg/ml，可直接使用。按照DNA：Delivector=1：3的比例来操作，1ml本品足以用来转染330μg DNA。

 

保存说明：

-20℃保存，有效期1年

 

使用说明：（贴壁细胞）

1. 铺板：

       转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

2. 转染：（以6孔板为例）

a. 转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基，转染前去除该培养基。

b. 制备Delivector-DNA转染复合物（请严格按照以下步骤进行）：

①往300μl无血清培养基加入2μg质粒DNA,混匀。

②在混合物内加入6μl Delivector（1mg/ml）（DNA/Delivector=1：3），混匀。

③无菌环境，室温静置30min以形成Delivector-DNA转染复合物。

④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c. 将Delivector-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使复合物分散均匀。

3. 孵育：

a. 37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染12-18h，去除含Delivector-DNA复合物的培养液，更换新鲜的培养基。

b. 通常，转染36-48h后能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

 

注意事项：

1. 收到本品或第一次使用前，请根据单次用量分装后置于-20℃冻存，尽量减少反复冻融次数。

2. 本品为无菌溶液，请严格按照无菌操作进行。

3. 请使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm / 280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有条件，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

4. 请使用保存适当和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。细胞如果是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

5. 对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

6. 对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

7. 推荐用商业化的无血清培养基比如Opti-MEM I来稀释DNA和DELIVECTOR，制备转染复合物。

8. 转染过程中请不要使用抗生素。

9. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

10. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

细胞密度表（表一）：

 

培养容器	单孔表面积	培养基用量		DNA转染
		铺板培养基用量	稀释培养基用量	DNA	Delivector
96-well	0.3 cm2	100µl	2 × 25 µl	0.2 µg	0.5 µl
24-well	2 cm2	500µl	2 × 50 µl	0.8 µg	2.0 µl
12-well	4 cm2	1 ml	2 × 100 µl	1.6 µg	4.0 µl
6-well	10 cm2	2 ml	2 × 250 µl	4.0 µg	10 µl
60-mm	20 cm2	5 ml	2 × 0.5 ml	8.0 µg	20 µl
100-mm	60 cm2	15 ml	2 × 1.5 ml	24 µg	60 µl

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海