产品介绍：

别名：D-萤光素钠盐  D-Luciferin sodium ； D-(-)-Luciferin sodium  是萤光素酶底物（荧光素酶底物），

Cas：103404-75-7

可催化生物发光昆虫产生典型的黄绿光。荧光 :λex 328 nm, λem 532 nm in water

 

 

      D-荧光素(D-Luciferin) 是萤火虫荧光素酶的常用底物，在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下，荧光素酶可氧化荧光素底物， 发出波长约为 560 nm 的黄绿色生物荧光，反应原理如下所示：

                           

      将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞或导入研究动物体内，注入荧光素，通过生物发光成像技术来检测光强度 变化，从而实现对疾病发展进程或药物疗效的实时监测。也可以利用 ATP 对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化 来指示能量或生命体征。

 

应用范围

*生物发光成像（Bioluminescence Imaging, BLI） 

*报告基因分析（Reporter Gene Analysis） 

*生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET） 

*高通量筛选（High-Throughput Screening，HTS） 

*化学发光法（Chemiluminescence Assay） 

*动物活体成像（Imaging in Animals） 

其他：以上应用仅供参考，请自行判断该产品在其特定应用中的适用性。

 

使用方法：
一、体外生物发光检测
1. 用无菌纯净水 对 D-荧光素钠盐 进行溶解，配制 30mg/mL的 D-荧光素钠盐 储备溶液 (100-200×) 摇均匀后即可使用，不能立即使用的 储备液可进行分装后，在-20℃避光条件下保存，避免反复冻融，对时机活性造成影响；
2. 在37℃恒温条件下预热处理组织培养基10-20分钟，再将处理后的培养基倒入储存液中，稀释至0.15-0.3 mg/mL（根据实验调节浓度）的工作液浓度；
3. 之后再去除混液中的细胞培养基；
4. 等待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，恒温37℃条件下孵育5-10 min，之后再进行图像分析。
二、活体成像分析
1. 采用无菌的氯化钠配制成为：10 mg/mL的荧光素的储存液，混匀。
2. 使用水系0.2 µm真是滤器过滤对储备液进行除菌处理，处理后可即使使用，或者在-20℃避光条件下保存，避免反复冻融，对时机活性造成影响；
3. 腹腔注射（i.p.）：按照 100 mg/kg 的荧光素/体重浓度比例进行注射；
4. 注射入体内10-15 min后（等待光信号达到最强稳定平台期）之后，再进行成像分析；

小鼠注射方式如下：

注射方式	剂量
静脉注射（25-27gauge针头）	按10µl/g体重浓度，加入相应体积的10mg/ml荧光素工作液
腹腔注射（25-27gauge针头）	按10µl /g体重浓度，加入相应体积的10mg/ml荧光素工作液
肌肉注射（27gauge针头）	50µl，浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
鼻内注射（pipette）	50µl，浓度为3mg/ml荧光素工作液

备注：建议对每只不同的动物模型均需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期，保存以及操作的过程中都要避光以免影响实验。

 

验证结果：

1、小动物成像 ，10mg/ml浓度，100ul/只腹腔注射，三溴乙醇/阿弗丁（Avertin）麻醉剂麻醉

 

注意事项：

1、将D-荧光素钠盐配制为溶液后，建议根据实际需求分装后保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

2、为了确保最佳的实验效 果，配制好的溶液请尽量在短时间内使用。对于对检测灵敏度要求极高的实验。

3、 产品为非无菌形式，若用于细胞培养或体内实验，请做除菌处理。

4、 D-荧光素钠盐对光敏感，需避光操作。

5、注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，以确定最佳信号平台 期和最佳的检测时间。

 

文献：

1、Engineered Needlepatch for the treatment of acute kidney injury （Biomaterials  2026  IF:12.5）