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产品简介:
固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用;破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时,对待测细胞进行固定、破膜处理后,加入相应抗体或检测试剂,孵育一定时间即可上机分析。
操作步骤(参考)
试剂准备:取1ml破膜剂,加入到9ml PBS中,备用。
1. 至少收集1×106待测细胞,1500 rpm离心5 分钟,弃上清。
2. 加入 500ul固定剂。
3. 固定10 分钟。
4. 1500 rpm离心5 分钟。
5. 弃上清,加入PBS洗一次,1500 rpm离心5分钟。
6. 弃上清,加入1mL破膜剂。
7. 室温孵育10-15 分钟。
8. 1500 rpm离心5 分钟。
9. 弃上清,加入100ul破膜液重悬细胞。
10. 加入胞核检测抗体进行染色后,pbs洗涤后,用流式细胞仪进行分析。
注意事项:
1、如果有膜蛋白,请在步骤2前,先染膜蛋白 ,再做步骤2的固定
2、在第9步骤,可以用染色缓冲液重悬细胞,但是我们建议用破膜液稀释抗体,效果会更好。
本产品在文章中的写法:
英文: Dowobio (Shanghai,China)
中文: 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio,上海