背景

棕榈酸（C16:0）是长链饱和脂肪酸，各种脂类的重要组分在细胞膜形成，信号传导和能量储存中扮演重要角色。然而棕榈酰链可以连接在蛋白上，此称之为蛋白棕榈酰化（S-棕榈酰化），这种修饰影响蛋白的定位和功能。在人体中棕榈酸是通过脂肪重新合成中产生，此过程主要发生在脂肪细胞，肝脏细胞和乳腺细胞中。棕榈酸被用来磷脂和鞘脂的合成，通常是经过其他脂肪酸（例如，硬脂酸和油酸）的延伸或者脱保和处理，有些可以通过酯化生成甘油三酯储存脂质。蛋白棕榈酰化在蛋白结构和功能中起重要作用，和其他脂质修饰不同，蛋白棕榈酰化是高度动态的，棕榈酰化和去棕榈酰化循环调控着蛋白的功能和定位。

S-棕榈酰化是一种重要的蛋白翻译后修饰，通常棕榈酰通过形成硫酯键链接在蛋白的半胱氨酸残基上。

 

 

实验步骤：

第一部分：

Coip IP 分离目的蛋白

 

 

第二部分

目的蛋白棕榈酸化生物标记

 

第三部分

WB检测目的蛋白

 

 

主要试剂

货 号	名 称	规 格
DW1005	蛋白裂解液（IP）	100ml
DW1002	BCA蛋白浓度测定试剂盒（增强型）	500T
DW1128	Protein IP (Co-IP) Kit	20T
DW1154	棕榈酰化标记试剂盒	20T

 

 

 

 

注意事项：

 

1、本次实验的抗体必须是IP级的抗体，或者标签抗体

2、本实验最好是一次性连续完成