产品介绍：

      染色质免疫共沉淀（ChIP）试剂盒，包含足够完成 20个反应的试剂。

 

试剂盒组分：

产品编号	产品名称	包装	保存温度
DW1151-A	Cell lysis buffer	25ml	4℃，一年
DW1151-B	Low salt wash buffer	80ml	4℃，一年
DW1151-C	High salt wash buffer	25ml	4℃，一年
DW1151-D	Protein A/G磁珠	1ml	4℃，一年
DW1151-E	LiCl wash buffer	25ml	4℃，一年
DW1151-F	Elution buffer	1ml	4℃，一年
DW1151-G	5 M NaCl	500ul	-20℃，一年
DW1151-H	Proteinase K	100ul	-20℃，一年

蛋白提取：

细胞加入1mLChromatin IP Buffer，【注】使用前加入适量蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，充分混匀，冰上反应10分钟，14000g，10min。

免疫复合物制备：

1. 将每个样品（细胞裂解液）的总蛋白定量为500-1000μg（推荐）。

2. 用Protein IP Lysis Buffer将已定量的样品稀释至500μL，加入2–10μg抗体（IP级），温和混匀。

3. 在室温旋转孵育2小时，或4°C过夜（推荐），以形成免疫复合物

CH-IP：

1. 将Protein A/G Magnetic Beads重悬，取50μL至新的离心管中。

2. 将离心管置于磁力架上，收集磁珠并弃掉上清液。

3. 加入100μLChromatin IP Buffer，重悬磁珠，将离心管置于磁力架上，收集磁珠并弃掉上清液。

4. 重复步骤4和5，一次。

5. 将Chromatin IP Mix加入上述含有磁珠的离心管中，4°C旋转孵育2小时。

6. 将离心管置于磁力架上，收集磁珠并弃掉上清液。

7. 加入1 mLLow Salt Wash Buffer温和重悬磁珠，在4°C旋转孵育5分钟。

8. 重复步骤8和9，2-3次。

9. 将离心管置于磁力架上，收集磁珠并弃掉上清液。

10.加入1 mLHigh Salt Wash Buffer洗液，在4°C旋转孵育5分钟。

11.将离心管置于磁力架上，收集磁珠并弃掉上清液。

12.加入1mL LiCl Wash Buffer，温和重悬磁珠。

13.将离心管置于磁力架上，收集磁珠。【注】上清液可用于分析未结合的样品是否被洗净。

14.加入100μL Elution Buffer至每个反应中，涡旋，在65°C孵育30分钟。

15.将离心管置于磁力架上，收集上清液至新的离心管中。

16.向每个反应中加入6μL 5M Nacl和2μL Proteinase K,在65℃反应2小时或过夜。该样品可置于-20℃保存数天。

17.纯化DNA。（可用DNA纯化试剂盒或酚氯仿）

 

注意事项：

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海