自备材料：

1. 4%多聚甲醛

2. 蒸馏水

3. 系列乙醇

操作步骤(仅供参考)：

1. 样品处理

a)对于石蜡切片：

二甲苯中脱蜡5～10min。

更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。

无水乙醇5min。

90%乙醇2min。

70%乙醇2min。

蒸馏水2min。

b)对于冰冻切片：

蒸馏水2min。

c)对于培养细胞：

用4%多聚甲醛固定10min以上。

蒸馏水洗涤2min。

更换新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2. 甲基绿染色

a)对于上述处理好的样本，用Methyl Green Stain(0.1%)染色5～10min。

b)用蒸馏水冲洗2次，此时样本呈蓝色。

c) 95%乙醇处理5s。

d)用70%乙醇洗涤2次，直接观察或按下列组织切片操作步骤进行。

3. 组织切片染色

a) 95%乙醇脱水2min。

b)更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。

c)二甲苯透明5min。

d)二甲苯透明5min。

e)中性树胶或其它封片剂封片。

f)显微镜下观察，细胞核呈绿色或蓝绿色。

4. 荧光染色

a)如果进行免疫荧光染色，在甲基绿染色液染色后，70％乙醇洗涤2次，每次2min。

b)95%乙醇脱水2min。

c)PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。

d)进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

染色结果：细胞核呈绿色或蓝绿色。

注意事项：

1. 首次使用本染液时建议先取1~2个样品做预实验。

2. 甲基绿染色可以根据染色结果和要求调整时间。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 甲基绿又称双绿SF，属于碱性染料，是具有金属光泽的绿色微结晶或粉末，。 甲基绿染色液(MG，0.1%)在组织或细胞染色中对细胞核进行染色，常用于鉴定DNA，细胞核中的DNA遇甲基绿会被染成蓝绿色，本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿复染。

一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。