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实验步骤:
1、 培养细胞:消化细胞,PBS洗涤,1000g离心3min收集细胞,计数。每次提取需要5 ×107个细胞,加入1.0 mL冰预冷的A液重悬细胞,4度震荡细胞悬液10分钟。
2、在700 x g和4°C下离心10分钟。将上清倒入新的冷冻管中,丢弃含有细胞核和完整细胞的颗粒。
3、再次在700 x g下在4°C下离心10分钟,然后将上清倒入新的冷冻管中。
4、在4°C下,10000 x g离心15分钟。丢弃上清,在沉淀里面加1ml A液+10ul B液。
5、在4°C下,10000 x g离心15分钟,丢弃上清,将最终颗粒重新悬浮在尽可能小体积(约0.1 ml)的萃取缓冲液或特定的实验缓冲液中。颗粒即为线粒体。
注意事项:
1. 尽量减少反复冻融的次数,可以根据使用的量适当分装。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品在文章中的写法:
英文: Dowobio (Shanghai,China)
中文: 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio,上海