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产品介绍:
罗丹明 123 是一种亲脂性阳离子荧光探针,能穿过活细胞的膜。线粒体内膜本身因富含负电性 的糖蛋白而带负电荷,内膜外有大量质子积累造成外正内负的跨膜电位差。而罗丹明 123 具有正电荷,由于电性相吸,特异的标记上线粒体。可用蓝光激发,被标记的线粒体发出绿色荧光。 罗丹明 123 由于带阳离子所以当线粒体膜电位存在的时候就会聚集到线粒体上,而当膜电位下降的时候,聚集的罗丹明 123 就减少,从而发光强度降低。
中文名: |
罗丹明123 |
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英文名: |
Rhodamine B |
分子式: |
C21H17ClN2O3 |
分子量: |
380.82 |
Cas号: |
62669-70-9 |
保存说明:
室温避光保存,溶于 DMSO 配制成母液后-20℃保存。
溶解性:
溶于乙醇,参考浓度1mg/ml。
溶液的配制:
用DMSO溶解,终浓度为1-5 mM。溶液分装,避光保存于-20 ºC。
波长:最大激发波长为507nm,最大发射波长为529nm
染色程序:
使用方法(流式检测)
1. 常规制备细胞悬液,用 PBS 缓冲液漂洗两次(缓冲液预热至室温或 37℃),细胞数为(1-2)× 10 6 /ml.
2. 将罗丹明 123 加入到细胞悬液,使终浓度 5ug/ml,在 37℃下放置 30 分钟。 3. 用 PBS 缓冲液洗 3 次,洗去没有结合的染料。
3. 加入 0.5mlPBS,尼龙网过滤后上机分析。
注:若罗丹明 123 终浓度 1umol/L,可不洗染液直接上机。
使用方法(显微镜)
1. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为 5×10^4~5×10^5个/mL。
2. 孵育该载玻片,用 PBS或Hank’s 液洗涤细胞。
3. 用培养基稀释 Rh123母液以制备 1~20µM Rh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。
4. 将 Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育 30 分钟至 1 小时。
5. 去除 Rh123 缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入 4%多聚甲醛固定 15~20 分钟,接着用 PBS洗涤)。
6. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 微量/粉末溶解前请先短暂离心,以保证产品全在管底。
3. 请勿吸入、吞咽或者直接接触皮肤和眼睛。
4. 本产品仅用于科研用途,禁止用于人身上。
本产品在文章中的写法:
英文: Dowobio (Shanghai,China)
中文: 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio,上海