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产品介绍:
本品油红O染色液为即用型,可直接使用,无需现用现配、过滤等步骤,适用于细胞、组织冰冻切片、骨髓涂片或血涂片等样品,但不适合用于石蜡切 片样品。
储存条件:
室温,避光保存,有效期一年。
使用说明(仅供参考):
1. 样品处理:
a. 对于细胞:
①缓慢吸去细胞培养液,PBS洗涤1次。
注:对于贴壁不太好的细胞,加入任何溶液时,不宜直接将溶液加到细胞上,而应沿着孔板壁缓慢加入,然后轻轻
②混匀,这样可以避免将在加入溶液时使细胞漂浮起来。
③加入4%多聚甲醛固定液或10%甲醛溶液固定10min,PBS漂洗2次。
b. 对于冰冻切片:
取出预制好并保存于-20ºC的冰冻切片,放入切片架回温5-10min。
c. 对于骨髓涂片和血涂片:
①取少许样品置于载玻片上,将推玻片与载玻片保持30°角,用推玻片来回将骨髓推匀于玻片表面,最好制稍厚一点的涂片。将涂片在空气中自然干燥或吹干。
②选做:用4%多聚甲醛固定液或10%甲醛溶液固定10min,固定后PBS漂洗2次。
2. 油红O染色。
a. 对于细胞:
①加入适量洗涤液覆盖细胞20秒。
②吸除洗涤液,加入适量油红O染色工作液,染色10-20min。
注1:染液体积均匀覆盖细胞即可,以6孔板为例,可加入1ml染色工作液。
注2:可适当延长染色时间,但不要超过1小时。
①去除油红O染色工作液,加入适量洗涤液,静置30秒,然后去除洗涤液,用蒸馏水洗涤20秒。
②选做:可用苏木素染色液进行细胞核的复染,染色3-5min,蒸馏水漂洗。
③加入适量PBS,均匀覆盖细胞即可,显微镜下观察和拍照。
b. 对于冰冻切片、骨髓涂片和血涂片:
①加入适量洗涤液覆盖样品20秒。
②吸除洗涤液,用蒸馏水稍清洗。
③将配制好的油红O染色工作液滴加于切片上,或直接将切片浸入染色工作液中,密闭染色
10-20min。
注:可适当延长染色时间,但不宜超过1小时。
④去除油红O染色工作液,将适量洗涤液滴加于切片上,静置30秒,然后去除洗涤液,浸入蒸馏
水中置于摇床洗涤20秒。
⑤选做:可用苏木素染色液进行细胞核的复染,染色3-5min,蒸馏水漂洗。
⑥染色完成后可以直接观察和配制。也可以使用水性封片液封片,推荐使用Dowobio的抗荧光淬灭封片
液,然后镜下观察和拍照。
注意事项:
1. 第一次使用本试剂时建议先取1-2个样本做预实验。
2. 油红O溶液是饱和溶液,室温或4ºC保存时,可能会有少量沉淀析出或瓶壁有少量不溶物粘附,不影响使用。
3. 油红O染色时,应避免染色工作液挥发,否则染色工作液可能会形成沉淀而产生背景。
4. 油红O染色结果不能长期保存,染色完毕后应尽快观察拍照。
5. 样品固定时请使用4%多聚甲醛固定液,不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品在文章中的写法:
英文: Dowobio (Shanghai,China)
中文: 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio,上海