产品介绍：

碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。

储存条件:

-20℃，避光保存。

 

使用说明（仅供参考）：

1. 细胞样品的制备：

a. 贴壁细胞：

1) 离心使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl培养液，以免吸走细胞。

2) 加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。

3) 离心使细胞沉到管底。

b. 悬浮细胞：

1) 离心使细胞沉到管底。

2) 小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl培养液，以免吸走细胞。

3) 加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。

4) 离心使细胞沉到管底。

5) 小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl PBS，以免吸走细胞。

2. 细胞的固定：

加入1ml冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃条件下固定2h或更长时间。4℃固定12～24h可能效果更佳。

3. 细胞的清洗：

a. 离心使细胞沉到管底。

b. 小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl溶液，以免吸走细胞。

c. 加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。

d. 离心使细胞沉到管底。

e. 小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl PBS，以免吸走细胞。

f. 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

4. PI染色：

在每个待检细胞样品中加入500ul配制好的PI染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，置于37℃避光水浴30min。

 

5. 检测与分析：

用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞DNA或RNA含量分析和光散射分析。

6. 染色结果：

凋亡细胞G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型，在光散射谱上，前向光散射低于正常，侧向光散射高于正常。

 

注意事项：

1. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

3. 在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。

4. PI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海