产品包装：

产品编号	产品名称	包装	保存温度
A	CFDA SE溶剂	500ul	-20℃
B	CFDA SE细胞标记液（10X）	20ml	-20℃
	说明书	一份

 

自备试剂及耗材：

吸头/吸水纸/离心管

 

实验步骤：

1. 检测前的准备：

. CFDA SE细胞标记液的配制：准备适量无菌的细胞培养级纯水，根据实验需要配制适量的CFDA SE细胞标记液。例如，取20ml 试剂C，加入180ml细胞培养级纯水，混匀后即为CFDA SE细胞标记液。配制好的CFDA SE细胞标记液可以4ºC保存，长时间不用可以-20ºC保存。

 

2. 标记和检测：

a. 用1ml CFDA SE细胞标记液悬浮100万至500万细胞，置于15ml离心管内。

b. 用CFDA SE细胞标记液稀释CFDA SE储存液(1000X)至2X。例如取2微升CFDA SE储存液(1000X)至1mlCFDA SE细胞标记液中，混匀后即为CFDA SE储存液(2X)。

c. 把1mlCFDA SE储存液(2X)加入到步骤2.a中含有1ml待标记细胞的15ml离心管内，轻轻混匀。

d. 37ºC孵育10分钟。

e. 立即在15ml离心管内加入约10ml完全细胞培养液(含血清)，室温颠倒数下混匀。

f. 室温离心去上清，再用5-10ml完全细胞培养液洗涤一次。

g. 再加入5-10ml完全细胞培养液，37ºC孵育5分钟，以促进CFDA SE在细胞内的驻留及未反应的CFDA SE进入完全细胞培养液。离心去上清，完成最后一次洗涤。

h. 随后即可按照细胞的正常培养方法进行培养。可以在荧光显微镜下直接观察标记效果，也可以在培养适当时间后用流式细胞仪检测细胞增殖，或用于特定目的的细胞示踪。标记的细胞也可以用于活体动物的移植，并用荧光进行示踪。标记的细胞呈绿色荧光。

 

注意事项：

1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕，最长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解，在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。

2. CFDA SE溶剂在4ºC、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。

3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海