Western Blot即蛋白免疫印迹，是根据抗原抗体的特异性结合检测样品中目的蛋白的方法。这种技术是把SDS-PAGE电泳分离的蛋白组分从凝胶转移到一种固相载体（如PVDF或NC膜）上，以针对某种或某类蛋白的特异性抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应，再与酶标记的第二抗体反应，经过底物显色以检测特异性蛋白的表达水平。
    由于Western Blot技术操作简便，目前该技术广泛用于蛋白表达水平的检测，对蛋白进行定性和半定量分析。

技术优势
（1）高效蛋白提取液进行高质量蛋白的提取，同时高效的蛋白酶抑制剂有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用；
（2）拥有多年的Western Blot检测经验，为客户提供专业的技术服务。
（3）客户设置预实验，根据客户样品具体情况摸索最适上样量和抗体最适稀释度。
 
样品要求
 
客户需提供新鲜或正确保存的蛋白样品或者蛋白提取液，阳性对照样品（细胞或组织）， 检测目的蛋白的一抗（或由多沃生物代购）。样品要求为：
1、细胞不少于5×106个；
2、组织样品不少于50mg；
3、总蛋白浓度不低于 2μg/μl（至少50μl）。
 
 
 
实验内容
1、蛋白提取和定量（如果提供蛋白样品，则直接电泳预实验检测抗体特异性）；
2、SDS-PAGE 10-15% 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳；
3、转膜（PVDF膜）；
4、封闭（5%脱脂奶粉）；
5、一抗孵育（其中内参基因为Tubulin、GAPDH或Actin）；
6、二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成实验无法继续，则收取相关预实验费用）；
7、显色（ECL）；
8、曝光、洗片、分析。

结果示意图:

 

实验结束后，我们将向您提供:

1. 剩余的样品和抗体
2. 实验报告

  服务周期:
服务内容 说明 价格 实验周期
 
Western-Blot 总蛋白 1200元/膜 7个工作日
 膜蛋白 1200-1700元/膜（膜蛋白抽提50元/样品） 7个工作日
 核蛋白 1200-1700元/膜（膜蛋白抽提50元/样品） 7个工作日
 
  温馨提示:
     1. 细胞样品10*6个以上，收集干细胞后放-80℃冰箱或液氮保存
     2. 组织样品100mg以上, -80℃冰箱或液氮保存
     3. 一抗、核（膜）蛋白抽提试剂盒需客户提供
     4. 内参免费（一般选用GAPDH内参）